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021-60767003產品介紹
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PCR檢測試(shi)劑盒技術原理:
DNA的半保留復制是生(sheng)物(wu)進(jin)化(hua)和傳代的重要途徑(jing)。雙鏈(lian)DNA在多(duo)種酶的作用下(xia)可以變性解鏈(lian)成單鏈(lian),在DNA聚合酶與啟動子的參與下(xia),根據堿基互補配(pei)對原(yuan)則(ze)復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚(ju)(ju)合(he)(he)酶鏈式反應實(shi)驗中發現(xian),DNA在高溫(wen)(wen)時也可(ke)以發生變(bian)性解鏈,當(dang)溫(wen)(wen)度降低后(hou)又可(ke)以復(fu)(fu)性成為雙(shuang)鏈。因(yin)此,通過溫(wen)(wen)度變(bian)化(hua)控制DNA的變(bian)性和復(fu)(fu)性,并(bing)設計引物做啟動子,加入DNA聚(ju)(ju)合(he)(he)酶、dNTP就可(ke)以完成特(te)定基因(yin)的體外(wai)復(fu)(fu)制。( DNA高溫(wen)(wen)變(bian)性低溫(wen)(wen)復(fu)(fu)性)
發現耐(nai)熱(re)DNA聚合同酶(mei)--Taq酶(mei)對于(yu)PCR的應(ying)用(yong)有里程碑的意(yi)義,該(gai)酶(mei)可以(yi)耐(nai)受90℃以(yi)上的高(gao)溫而不失(shi)活,不需要(yao)每個循環加酶(mei),使PCR技(ji)術變得(de)非常簡捷(jie)、同時也大大降低了(le)成(cheng)本,PCR技(ji)術得(de)以(yi)大量應(ying)用(yong),并逐步應(ying)用(yong)于(yu)臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 規格 | 貨(huo)號(hao) |
PCR檢測試劑盒 | 50次 | BK-P9536 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特(te)異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引(yin)物(wu)與模板DNA特異(yi)正確的(de)結(jie)合(he);
②堿基(ji)配對原則;
③Taq DNA聚合酶(mei)合成反應的忠實性(xing);
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模(mo)板(ban)
2.對應目的(de)基因(yin)的(de)特異引物(wu)(在(zai)PCR反應中(zhong),新合(he)成的(de)DNA是要(yao)接在(zai)一小段序(xu)列(lie)上(shang)才(cai)能(neng)繼續按(an)照模板(ban)DNA復制,而不(bu)能(neng)從(cong)無到有,憑空合(he)成。這一小段序(xu)列(lie)就是你(ni)所要(yao)有設(she)(she)計(ji)的(de)引物(wu)。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需(xu)要(yao)根據你(ni)的(de)模板(ban)鏈(lian)設(she)(she)計(ji)。因(yin)此,擴(kuo)增不(bu)同(tong)的(de)基因(yin)需(xu)要(yao)設(she)(she)計(ji)不(bu)同(tong)的(de)引物(wu))
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰(bing)浴中(zhong),按以下次序將各成分加(jia)入一無(wu)菌(jun)0.5ml離心(xin)管中(zhong)。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(mei)(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應(ying)程序。將上述混(hun)合(he)液稍加(jia)離(li)心(xin),立(li)即置(zhi)PCR儀上,執(zhi)行擴增。一(yi)般:在(zai)93℃預變性(xing)3-5min,進(jin)入循環擴增階(jie)段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后(hou)在(zai)72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待(dai)電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的(de)電泳檢測:如在反應(ying)管(guan)中加有石蠟油(you),需(xu)用100μlLuFang進行(xing)抽提反應(ying)混合液,以除去石蠟油(you);否則,直接取(qu)5-10μl電泳檢測。
雞C反應蛋白(CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞B因子(BF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
雞1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
M1(AFM1)ELISA 試劑盒(he) 48T/96T 試劑盒(he)
B1(AFB1)ELISA 試(shi)(shi)劑盒 96T/48T 試(shi)(shi)劑盒
素(Aflatoxin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
槐凝集素(SJA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
花生凝集素(PNA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
猴子腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
猴子乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
PCR檢測試劑盒葡萄糖轉運蛋白2抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:GLUT2
G蛋白偶聯(lian)受體52抗體 規(gui)格: 0.2ml 英(ying)文名(ming)稱:GPR52
G蛋白偶聯受體115抗(kang)體 規格: 0.2ml 英文名稱:GPR115
G蛋(dan)白偶聯(lian)受(shou)體151抗(kang)體 規格: 0.2ml 英文名(ming)稱:GPR 151
葡萄糖苷酶2β/Glucosidase IIβ抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:Glucosidase 2 subunit beta
轉錄因子Gli3抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:Gli3
核突觸蛋白-γ抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:gamma Synuclein
小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體 規格: 0.2ml 英文名稱:hHb(H5A3)
組胺受體H1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:HRH1
HER2受體抗體 規(gui)格(ge): 0.1ml 英文名(ming)稱:HER2 receptor(NT)
A型禽流感病毒(du)H7N9 M1蛋白抗體(ti) 規格(ge): 0.2ml 英文(wen)名稱:H7N9 Matrix Protein 1
人乙型肝炎核心抗原單克隆抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:HBcAg(1H8)
熱休克蛋白-22抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:HSP22
磷酸化組蛋白H1.4抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:phospho-Histone H1.4(Thr18)
葡萄糖氧化酶1抗體 規格: 0.1ml 英文名稱:HAO1
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