實驗操作步驟(zou)：  公司(si)產品僅用于科研，不(bu)得用于臨床(chuang)．
a．采用認(ren)可(ke)的方案處(chu)死(si)嚙(nie)齒動物。    
b．立(li)即在無(wu)菌超凈(jing)臺(tai)內用(yong)70％乙醇(chun)擦洗整個動物。  
c．用(yong)無(wu)菌的(de)鑷子和剪子在(zai)前腿(tui)下作(zuo)一腹(fu)部水(shui)平切口(kou)，用(yong)無(wu)菌鑷子將(jiang)皮膚扯(che)向后腿(tui)。   
d．用另一無菌的剪(jian)刀和(he)鑷子(zi)切(qie)開腹部，取(qu)出含有胚胎的子(zi)宮(gong)，置于無菌的培養皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于(yu)無菌的含有(you)無菌PBS的100ml燒(shao)杯中。   
f．漂洗胚胎(tai)，去掉PBS。繼續用PBS漂(piao)洗(xi)胚(pei)胎直(zhi)至清洗(xi)液清亮為止。

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冷(leng)凍(dong)保存細胞之方法？
冷凍保存方法(fa)一(yi): 冷凍(dong)管置于(yu)4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘(zhong)*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷(leng)凍(dong)保(bao)存方法(fa)二: 冷凍管置(zhi)于已設定程(cheng)序之可(ke)程(cheng)序降溫機中(zhong)每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入(ru)液氮槽vapor phase長期儲(chu)存。*-20 ℃不(bu)可超過1 小(xiao)時(shi)， 以(yi)防止冰晶過大，造成細胞大量死(si)亡，亦可(ke)跳過此步(bu)驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低(di)一些。

實(shi)驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶(ping)；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒(shao)杯2個； 
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養皿(min)1個(ge)，細(xi)胞培養瓶1個(ge) 
5、1ml ，200μl移液(ye)器各1支(zhi)；槍(qiang)頭盒2個；無菌玻璃(li)攪拌棒1個 
6、細胞計數板1塊； 
7、滅(mie)好(hao)菌的鑷(nie)子1把，剪刀(dao)1把； 
8、酒精燈1臺；
細胞培養(yang)的優點：
1.研究(jiu)的對象是活細胞(bao)
在實驗過程(cheng)中，根據要(yao)求(qiu)可始終(zhong)保持細胞活(huo)(huo)力，并可長時間監控、檢測(ce)甚(shen)至定量評估一部分活(huo)(huo)細胞的情況，包括活(huo)(huo)細胞的形態、結構、生命活(huo)(huo)動(dong)等(deng)。
2.研究條件(jian)可(ke)以人為控制
pH、溫度、氧(yang)(yang)氣、二氧(yang)(yang)化碳、張力等物理(li)化學的條件(jian)，可(ke)(ke)以(yi)根據實際需(xu)要進行(xing)人為的控制，同時，可(ke)(ke)以(yi)施加化學、物理(li)、生物等因素作為條件(jian)而進行(xing)實驗觀察，這些因素同樣可(ke)(ke)以(yi)處(chu)于(yu)嚴格控制之下。
3.研究的樣本可(ke)以達到比(bi)較均一(yi)性
通(tong)過細(xi)(xi)胞(bao)培養一(yi)定代數后，所得到(dao)的細(xi)(xi)胞(bao)系則(ze)可以達(da)到(dao)均一(yi)性(xing)而屬于同一(yi)類型的細(xi)(xi)胞(bao)，需要時，可采用克隆化等方(fang)法使細(xi)(xi)胞(bao)達(da)到(dao)純化。
4.研究內容(rong)便于觀(guan)察(cha)、檢測和(he)記錄
采用各種研究技術(shu)：如倒置生物顯(xian)微(wei)鏡(jing)、熒光顯(xian)微(wei)鏡(jing)、電子(zi)顯(xian)微(wei)鏡(jing)、流(liu)式細(xi)胞術(shu)、激光共焦顯(xian)微(wei)鏡(jing)、免疫組(zu)織化學(xue)、原(yuan)位雜交、同位素標(biao)記(ji)等各種儀器設(she)備 
記錄方式可采(cai)用(yong)攝影(ying)照(zhao)片、縮時電影(ying)、電視等(deng)多種手段(duan)。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學(xue)科領域較為寬(kuan)廣，如細(xi)胞(bao)學(xue)、免(mian)疫學(xue)、腫(zhong)瘤學(xue)、生(sheng)物化(hua)學(xue)、遺傳學(xue)、分子生(sheng)物學(xue)等；
適用的對象范圍廣，從低等動(dong)(dong)物(wu)(wu)到高等動(dong)(dong)物(wu)(wu)，一種(zhong)動(dong)(dong)物(wu)(wu)的不同年(nian)齡階段以及不同組織，都可進行(xing)有針對性(xing)的研(yan)究(jiu)。
6.研(yan)究(jiu)的(de)費用相對(dui)較經濟(ji)
可提供(gong)大量(liang)、同一(yi)時期、重(zhong)復性(xing)好的(de)、生物學性(xing)狀相似的(de)實驗對象。

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細胞(bao)凍存(cun)：
對培(pei)養(yang)的細(xi)胞(bao)進行凍(dong)存的最佳方法是將細(xi)胞(bao)置(zhi)于含有(DMSO)等(deng)冷(leng)凍保(bao)護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷(leng)凍保(bao)護劑可(ke)降低培養基的冰(bing)(bing)點，并可(ke)減緩冷(leng)卻速(su)度嗎，大(da)大(da)降低冰(bing)(bing)晶(jing)形(xing)成的危險  (冰晶可損傷細(xi)胞(bao)，導致細(xi)胞(bao)死(si)亡)。
注：DMSO 可促(cu)進有機分子進入(ru)組(zu)織。操作含DMSO的試劑時，應采用(yong)與此(ci)類(lei)物(wu)質安全危害相適應的設備(bei)和(he)操作規(gui)(gui)范，并應按(an)照當地法規(gui)(gui)處置此(ci)類(lei)試劑。 
細胞凍存指導原則
凍存細(xi)胞系以備(bei)將(jiang)來之用(yong)時，必須遵守(shou)以下原則(ze)。與其他(ta)細(xi)胞培(pei)養操(cao)作一樣(yang)，我們建(jian)議您(nin)嚴(yan)格(ge)遵守(shou)您(nin)所用(yong)細(xi)胞系附帶的操(cao)作說明，以便(bian)獲得(de)最佳(jia)結果。 
1）在高(gao)細(xi)胞濃(nong)度情況下進行培養細(xi)胞的凍存(cun)(cun)，并且(qie)細(xi)胞傳代次(ci)數盡可能少。確保凍存(cun)(cun)前(qian)活細(xi)胞百(bai)分比至少為90%。請注意最佳(jia)凍存條件取決于所用細(xi)胞系(xi)。 
2）細胞應緩慢冷凍(dong)(dong)，可(ke)使用可(ke)控制降(jiang)溫(wen)速(su)度的低(di)溫(wen)冰箱或者低(di)溫(wen)冷凍(dong)(dong)容(rong)器使溫(wen)度每分鐘大約降(jiang)低(di)1°C。
3）必須使用推薦的凍存培(pei)養基。凍存培(pei)養基中應含有 DMSO 或(huo)者甘油等冷(leng)凍保護劑(ji)
4）將冷凍的(de)細胞于(yu) -70°C 以下溫(wen)度儲(chu)存；溫(wen)度高于(yu) -50°C 時，冷凍的細胞將(jiang)開(kai)始變質。 
5）必須(xu)使用(yong)無菌凍(dong)存管儲存冷凍(dong)的細胞。裝有(you)冷凍(dong)細胞的凍(dong)存管可浸于液氮或者(zhe)在(zai)液氮上方的氣相空間內保存 
6）必須穿戴個人防(fang)護設備(bei)。 
7）所有與細胞接觸的溶(rong)液和(he)設(she)備均(jun)應為無(wu)菌(jun)狀態(tai)。必須采用(yong)正(zheng)確的無(wu)菌(jun)技(ji)術，并(bing)且在(zai)層流通風櫥(chu)內進行。

實驗操作(zuo)：
1、培(pei)養(yang)瓶預(yu)包(bao)被。試驗前一(yi)天預(yu)包(bao)培(pei)養(yang)瓶，置于超靜(jing)臺吹干或45℃烘(hong)箱(xiang)烘(hong)干(gan)（切記(ji)保持無菌(jun)），4℃冰箱(xiang)放(fang)置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹(fu)腔注射5%麻醉，75%酒精(jing)浸(jin)泡，無菌條件下迅速(su)取出大鼠主動脈(mo)。
3、材料預(yu)處理：將獲取的血管(guan)放入含(han)有1% P/S的(de)1 × PBS （pH 7.4 ）中反(fan)復洗滌(di)，去(qu)除血(xue)管(guan)外部(bu)的(de)洗滌(di)液澄(cheng)清，用無菌鑷(nie)子(zi)剝去(qu)外膜面的(de)殘(can)留(liu)組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將血管(guan)縱向剪(jian)開(kai)， 內(nei)膜面向上(shang)，無菌鑷(nie)子沿(yan)中軸方向反(fan)復刮動內(nei)膜層4-5遍，去掉內皮(pi)細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌(di)3次(ci)。
5、分離中膜(mo)(mo)(mo)：將去(qu)(qu)掉內膜(mo)(mo)(mo)的(de)血管，繼續刮動分離中膜(mo)(mo)(mo)，去(qu)(qu)掉外(wai)膜(mo)(mo)(mo)，用眼(yan)科(ke)剪將內膜(mo)(mo)(mo)剪碎為1×1mm3的小塊，加入(ru)1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中(zhong)，PBS洗(xi)滌3次，離心收集沉淀物。
6、消(xiao)化：在洗凈的內膜碎塊(kuai)中加入(ru)消(xiao)化酶液，將離心(xin)管放入(ru)37℃水(shui)浴(yu)消化15min。
7、終止(zhi)消化(hua)：吸(xi)出消化(hua)液入新的離心管中，按1：1加入消(xiao)化(hua)終(zhong)止(zhi)液，中止(zhi)酶反(fan)應；余下的組(zu)織繼續加入消(xiao)化(hua)液，消(xiao)化(hua)15min ，重(zhong)復消化3次。
8、收集(ji)(ji)重(zhong)懸細胞：收集(ji)(ji)中止(zhi)后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入(ru)培養液(ye)重懸(xuan)，染色計數細(xi)胞。
9、培養細胞密度(du)：調整(zheng)細胞密度(du)以5 × 105個/ml 接(jie)種入培養瓶。
10、培養：放置(zhi)于37℃，5% CO2培養箱中(zhong)。
大鼠雪旺細胞(bao)(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透(tou)明腺癌細(xi)胞 HumanN-叔丁氧羰基-L-天冬酰，英文名或英文縮寫：Boc-L-asparagine，級別：BR，98.5%，規格(ge)：25克(ke)

非(fei)洲綠猴腎細胞系/HCV-C;Vero-HCV-C1,2,4-本三羧臘(la)酐(gan) 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22-30-7

人骨骼肌星形細胞(bao)(HSkMSC)(5×105)每速 C MITOMYCIN C 1920-7-7

CL-0235TSCCa(人舌鱗癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×23-[N-[三(san)(羥(qian)甲基)甲(jia)基]基]磺酸鈉，英文名或英文縮寫(xie)：TAPS wo7ium salt，級(ji)別：AR，98%，規格：25克(ke)

人(ren)急性T細胞性白血(xue)病細胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細胞*培養基(ji) 100mLGDX　103(聚二(er)本多孔小球)NA
中國(guo)倉(cang)鼠卵巢細胞(bao);CHO鹽酸雷尼替丁(ding)Ranitidine HCl質量規格：>98%

Tul-1細胞，人肺(fei)癌細胞系 大鼠肝上皮樣干細胞,WB-F344細(xi)胞(bao) T-101B胰蛋白(bai)酶(含(han)100mL 酶解緩沖液)10mL鹽酸(suan)雷(lei)尼(ni)替丁(標準品)Ranitidine HCl質量規格：HPLC>98%,標準品(pin)

SK-MES-1(人肺(fei)鱗癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2熒光(guang)素鈉(na)Fluorescein di salt質量規(gui)格：BS

HUVEC-c pre-screened 預選型正常(chang)人臍靜脈(mo)內皮細胞(HUVEC) 500,000cells 大隱靜脈平滑(hua)肌(ji)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)D-蟲熒光素鈉(na)鹽;D-熒光素(su)鈉(na)鹽D-Luciferin  salt質量(liang)規格：>98%

原代骨骼肌細胞特制(zhi)基(ji)礎無血(xue)清(qing)培養基(ji)Many types of cells包裝：500/100ml2ˊ,7ˊ-二氯熒(ying)光素鈉鹽2',7'-Dichlorofluorescein  Salt 質量(liang)規(gui)格：>98%
大鼠胰腺癌細胞ES-2 人卵巢(chao)透明細(xi)胞癌細(xi)胞秦(qin)皮(pi)甲素(su)（標準品）Esculin質量規格(ge)：≥98%，標準品

CW-2人(ren)結腸腺(xian)癌細胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氨基三乙酸（標準(zhun)品）Nitrilotriacetic acid質量(liang)規格：供HPLC法雜(za)質(zhi)檢查用

TNFSF13 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標簽(qian))1，3-（標準品）1,3- Propylene Glycol質量(liang)規格：供檢查用(yong)

人脂肪細胞(bao)-皮(pi)下(HPA-s)(1×106 ) Raji，人Butt's瘤細胞 Human二甘(gan)醇（標準(zhun)品）Diethylene Glycol質量規格(ge)：供檢查用(yong)

人肺腺癌細胞(bao);Calu-3氯噻嗪（標準品）Chlorothiazide質量(liang)規(gui)格：供HPLC法系統適用性試(shi)驗(yan)用

• 人胃癌耐藥株Docetaxel多西他賽
• K562/Adr
• 1×10E6T25/管人肺癌耐順鉑耐藥株
• 1×10E6T25/管人結腸癌長春新堿耐藥株
• 人卵巢癌順鉑耐藥細胞
• 人前列腺癌耐藥株
• 1×10E6T25/管人肺癌紫杉醇耐藥株
• 1×10E6T25/管人鼻咽癌細胞鉑耐藥株
• 1×10E6T25/管人肺腺癌耐藥細胞株
• 1×10E6T25/管人胰腺腺癌鉑耐藥株